拆解我国首个人源干细胞国家标准，一份高质量细胞有哪些特质

培养基中培养14天后，

年轻组（19-40），中年龄组（41-60）和老年组（61-89岁）的干细胞计数对比

年轻态的干细胞胞体饱满、呈明显的梭形；

衰老的干细胞胞体宽大扁平

所以从年龄这个因素考虑，围产组织来源的脐带、胎盘、羊膜间充质干细胞（有零岁细胞之称）应该是最优的，年轻人的骨髓、脂肪间充质干细胞次之，老年人则不建议直接使用自体干细胞治疗。

接下来，是供者本身的身体状况。

《生物样本库多能干细胞管理技术规范》中要求使用已验证过的方法对干细胞进行真菌、细菌、传染病原体（包括HIV、HBV、HCV、HTLV、HCMV、EBV、TP等）和支原体检测，但这些只能算是基础。

除了病毒感染，许多疾病也会影响自体间充质干细胞的功能及效果，如遗传性疾病、自身免疫性疾病和部分慢性疾病等等。

以常见的糖尿病为例，2017年《Stem Cells Translational Medicine》（影响因子：6.9）上有研究证实[2]：长期患有2型糖尿病会降低干细胞的增殖能力、免疫抑制潜力及存活率。

研究证实：长期患2型糖尿病及肥胖会影响自体骨髓间充质干细胞的疗效。尤其是当你患有糖尿病超过10年且较为肥胖时，采用自体干细胞进行治疗就不会是一个明智的选择。

我们都知道，当干细胞回输到体内，只有活着的干细胞能真正起到修复或治疗的作用，失活细胞不仅有碍疗效，有时还会“帮倒忙”，引发机体毒性反应。

所以细胞存活率不但关乎细胞质量，更涉及人体自身的安全。也正因如此，T/CSCB-0002和T/CSCB-0005都要求未冻存细胞存活率≥90%。

除了干细胞本身的活性外，存储、运输条件也会影响细胞活率。如果存储或运输条件不合格，则可能导致细胞死亡、细胞膜破裂及内容物释放等。

生长活性其实有着许多评定标准，如细胞倍增时间、细胞周期、克隆形成率、端粒酶活性等等，而这些指标都被“细胞代次”所影响着。

细胞代次指的是干细胞在体外培养中的传代次数，一般刚从脐带、胎盘、羊膜等提取的干细胞是原始P0代，传一代是P1代干细胞，并以此类推。在此过程中，还有一个关键特性：即干细胞的生物学效力和增殖特性，会随着传代次数的增加逐渐下降。

图a代表P3代，图b代表P8代

那按照这个逻辑，如果我们想追求高活性，只要使用刚从组织中分离出来的P0代干细胞不就行了吗？事情没有那么简单。

首先，细胞代次并不宜低于3代。

处于这个代次的干细胞确实活性很高，可惜的是，它还没能经过足够的体外培养、扩增，这样可能导致：

一、细胞总数量不够。我们能看到在过往的干细胞临床试验里，干细胞回输量几乎都是千万级以上的，而P0-P3代次的干细胞才刚刚开始培养，干细胞含量客观来说很低，很有可能达不到使用标准。哪怕它各项活性都很好，也巧妇难为无米之炊。

二、细胞安全性不够。培养时间短，也意味着来不及进行彻底净化，其中可能残留提取过程中感染的细菌、病毒、微生物等有害物质。尽管这些代次的干细胞有很高的活性，但于安全角度，却十分堪忧。

这两点是不能用前3代的原因，我们再来看看不必执着前3代的理由。

从各代干细胞生长曲线检测结果来看，P4-P7代的数据其实也都在高活性范围之内，并未与前3代细胞形成断层差距，所以总结所有优势与缺点，P0-P3代细胞并不是优选。

体外培养P3/5/7/10/15代细胞的生长曲线

其次，细胞代次不宜高于7代。

P7代之后的干细胞，算是经过了足够的培养扩增，这细胞数量是上去了，但质量也是断崖式下跌。有研究表明，P7代次之后，干细胞增殖能力及遗传稳定性急剧下降，细胞凋亡的数量也很可怕，到了P15代晚期，凋亡细胞数量直奔50%，自然也不宜作为回输的代次选择。

所以在兼顾数量、安全及干细胞活性三方因素后，P3-P7代次的干细胞会是最佳选择。

总的来说，一份细胞质量的好与坏，是由细胞活率、细胞来源、细胞活性等多重因素共同决定的。如果只看重某一指标，影响疗效事小，引发安全问题事大。

不过随着干细胞技术的日益成熟，国家也在不断完善干细胞质量管控体系，整个行业正向着规范化、更加长远地利于临床转化的方向发展。相信在未来，一份高质量干细胞并不需要我们拥有“火眼金睛”，更多人们可以切身体会到干细胞的神奇。