耳蜗是平衡和声音感知的重要感觉器官,耳蜗的发育形成是一个复杂的生物学过程。小的细胞外囊泡(Small extracellular vesicles, sEVs)是一类直径在30-200nm范围的囊泡,它作为一种重要的信息传递介质参与到正常的生理和病理的过程。目前,对于组织中sEVs的研究尚少,其中组织sEVs研究中涉及的sEVs的提取就是一项很难的工作,而在耳蜗组织的研究领域还未探索过sEVs的功能以及其参与耳蜗发育过程中的作用。
2022年2月28日,东南大学生命健康高等研究院柴人杰教授团队在Cellular and Molecular Life Sciences(IF 9.261)上在线发表了题为“Characterization of the microRNA transcriptomes and proteomics of cochlear tissue-derived small extracellular vesicles from mice of different ages after birth”的研究论文。本研究提出了一种分离耳蜗组织sEV的方法,并且探究了在耳蜗发育过程中耳蜗组织sEVs发挥的生物学功能作用。
在本研究中,研究人员通过超速离心的方法从出生后第3天,第7天,第14天以及第21天的小鼠耳蜗组织中分离sEVs。首先,通过透射电镜(TEM),纳米粒子分析(NTA)对sEVs的形态和大小进行表征。接下来,利用免疫印迹(Western blot)和免疫荧光染色的方法对sEVs的标志性蛋白进行表征。最后,采用small RNA-seq和LC-MS/MS的方法对耳蜗组织sEVs进行miRNAs和蛋白组学分析进一步探究在发育过程中的sEVs中miRNAs和蛋白质发挥的重要作用。结果表明,本研究中提出的分离方法可以有效的从耳蜗组织中提取出sEVs,并且随着年龄的增长而发生改变的miRNAs和蛋白质参与了内耳的发育,解剖结构的形成,听觉神经系统形成等多种功能。因此,在整个耳蜗的发育过程以及听力的形成中sEVs发挥着至关重要的生物学功能,在本研究中筛选出的miRNAs以及蛋白质也为未来听觉研究提供了一些研究靶标。
东南大学生命健康高等研究博士生江佩,马翔宇为本论文第一作者,东南大学生命健康高等研究院柴人杰教授、张莎莎副研究员和生医学院陶纬国教授为本论文通讯作者。
论文链接
https://doi.org/10.1007/s00018-022-04164-x
来源:AutophagyAdvances
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