21名女性双盲试验：证明外泌体的皮肤增白功效 | Cosmetics

临床研究是根据赫尔辛基宣言和韩国皮肤病研究所（KDRI）的良好临床实践 (GCP) 指南进行的。

21名年龄在 39-55 岁之间、患有色素沉着过度的女性志愿者参与了这项研究。所有志愿者都被告知研究的细节，并签署了经 KDRI 机构审查委员会批准的知情同意书。

双盲试验本质上只是一个科研方法。它是一个广泛应用于医药领域和其他科学、社会学领域的一个科研方法。

对药品实验来说，双盲的含义指的是参与科研的医生不知道哪一组是实验组，哪一组是对照组。同时参与实验的受试者也不知道自己是属于哪一组。

研究表明，干细胞及其衍生物，包括条件培养基（CM），对皮肤色素沉着具有抑制作用。然而，缺乏支持干细胞来源的外泌体美白效果的证据。

外泌体包含各种货物，包括蛋白质、RNA 和脂质。ExoCarta 数据库中注册的 286 项研究表明，外泌体货物的复杂性包括 9769 种蛋白质、3408 种 mRNA、2838 种 miRNA 和1116种脂质。这些货物分子有助于外泌体在各种生物过程中的功能。

韩国ExoCoBio 外泌体研究所、韩国中央大学医学院皮肤科和美国关岛皮肤病研究所的科研人员研究了源自人间充质干细胞来源的外泌体的体外抗色素沉着作用和体内亮肤功效。相关研究成果发表在国际学术期刊Cosmetics上（下图）。

在该研究中，研究人员使用切向流过滤方法分离出外泌体。最终研究发现无论是否存在 α-促黑素细胞激素 (α-MSH)，外泌体都能降低 B16F10 黑色素瘤细胞的细胞内黑色素水平。

在这项前瞻性、分脸、双盲、随机安慰剂对照研究。与安慰剂对照相比，含外泌体的制剂在统计学上降低了黑色素含量。

然而，黑色素减少活动是有限的，并且会随着时间的推移而减弱。进一步改进外泌体的有效透皮递送方式将有助于获得更深远的疗效。总之，这些结果表明外泌体可用作美白皮肤的药妆品。

色素沉着过度或黑色素沉着症

该研究报告指出，色素沉着过度或黑色素沉着症是一种皮肤病，由黑色素在皮肤中过度积累引起，使皮肤不美观。

临床上，色素沉着过度障碍包括日光性雀斑、炎症后色素沉着过度、黄褐斑、雀斑和牛奶咖啡斑，具有不同的病理和黑素细胞受累。

它的特点是在脸颊、上唇、下巴和前额处出现较深的斑块。许多美白剂，如曲酸、氢醌、维甲酸和维生素 C，已被广泛用作局部治疗，但疗效有限和副作用较多。

虽然色素沉着过度不是危及生命的皮肤病，但它具有心理社会影响，可能会降低女性和男性的生活质量。治疗色素沉着过度仍然具有挑战性，因此对安全有效的皮肤美白替代品的需求尚未得到满足。

先前的研究报告称，干细胞条件培养基 (CM)，主要来自间充质干细胞 (MSC) 培养物，对皮肤具有抗衰老、抗皱和抗色素沉着等有益作用。

MSC 条件培养基 (MSC-CM) 中的分泌蛋白组含有可溶性蛋白质和细胞外囊泡 (EV)，包括外泌体。由于质膜和包含腔内囊泡 (ILV) 的多泡体融合，细胞通过内体途径产生外泌体 。

外泌体在细胞外空间释放，它们被包裹在直径为 30–200 nm 的脂质双层中，并含有蛋白质、信使 RNA (mRNA) 和微小 RNA (miRNA) 等遗传物质以及代谢物。

源自 MSC 的外泌体（MSC-外泌体）主要介导 MSC 治疗的旁分泌作用，是一种很有前途的下一代无细胞治疗选择。MSC-外泌体具有使皮肤再生或恢复活力的潜力。

具体而言，源自MSC 的外泌体可通过皮肤屏障修复和抗炎作用降低特应性皮炎的严重程度 。

外泌体也被证明可以在体外诱导人真皮成纤维细胞中 I 型胶原蛋白和弹性蛋白的合成。

尽管源自角质形成细胞的外泌体可调节黑色素生成的稳态，但缺乏支持 MSC 外泌体美白效果的证据。

在这份报告中，研究人员在一项前瞻性、分面、双盲、随机安慰剂对照研究中揭示了外泌体的体外抗色素沉着作用和含外泌体制剂的体内亮肤作用。

临床评估

临床研究是根据赫尔辛基宣言和韩国皮肤病研究所（KDRI）的良好临床实践 (GCP) 指南进行的。

根据韩国 MFDS 关于功能性评估的规定和相关指南，该研究被设计和实施为一项为期 8 周的前瞻性、分面、双盲、随机安慰剂对照研究。

21 名年龄在 39-55 岁之间、患有色素沉着过度的女性志愿者参与了这项研究。所有志愿者都被告知研究的细节，并签署了经 KDRI 机构审查委员会批准的知情同意书（批准号：KDRI-IRB-19599）。

排除标准包括怀孕或哺乳、光过敏或光敏、>1 个月使用含类固醇的乳膏、敏感性或过敏性皮肤，最近 6 个月内参加过类似研究，测试区域有皮肤异常，如斑点、痤疮、红斑和毛细血管扩张，最近 3 个月内使用过相同或相似的产品，并且积极使用用于美白皮肤的食品或药物。大约 0.2 g 的安慰剂（不含 ASC-外泌体）或测试制剂（含 ASC-外泌体）每天两次，持续 8 周。

在治疗前和治疗后 2、4 和 8 周进行皮肤评估。评价前，志愿者用洗面奶洗脸，用纸巾擦去残留水分。所有志愿者必须在 20–24°C 和 40–60% 相对湿度的受控环境中休息 30 分钟。黑色素水平使用 Mexameter (Courage + Khazaka Electronic GmbH, Köln, 德国）。五次测量的平均值用于确定改善率 (%)，计算如下：((治疗前值) − (治疗后值))/(治疗前值) × 100。

外泌体的亮肤功效

这项前瞻性、分面、双盲、随机安慰剂对照研究中对含有 外泌体的制剂进行了临床研究，以评估其亮肤功效。

安慰剂（不含 ASC-外泌体）或试验（含外泌体）制剂每天两次应用于 21 名女性志愿者的面部，持续 8 周。

在治疗前和治疗后 2、4 和 8 周使用 Mexameter 测量黑色素水平。黑色素水平在治疗后 2 周开始减少，与安慰剂治疗区域相比，在治疗 4 周后观察到具有统计学意义的减少（图1)。

然而，黑色素减少活性随着时间的推移而减弱（在第 8 周）。如治疗后 4 周观察到的，年龄

图1：ASC-外泌体美白效果的临床评价。在使用安慰剂（不含外泌体）或测试（含外泌体）制剂治疗前和治疗后 2、4 和 8 周，使用 Mexameter 测量 21 名女性志愿者的面部黑色素水平，每天两次，持续 8 周。( A ) 随着时间的推移黑色素减少。( B ) 不同年龄组的黑色素减少。n = 11 表示 40 秒，n = 8 表示 50 秒。* p

表 1. 每个志愿者的黑色素指数。

总结与展望

亮肤化妆品有助于改善肤色并减少皮肤色素沉着。它们越来越多地被用于获得均匀的肤色、减轻瑕疵和减少老年斑。

到 2025 年，美白产品的全球市场价值预计将达到 137 亿美元，并且在预测期内以 7.4% 的复合年增长率增长。

这种积极的趋势是因为消费者对现代社会的审美需求、皮肤色素沉着和衰老的认识不断提高。

黑色素沉积是由紫外线 (UV) 辐射引起的；它保护皮肤免受紫外线伤害。然而，黑色素细胞的过度活化会导致皮肤角质形成细胞的色素沉着。

因此，减少黑色素水平对于皮肤增白是必要的。黑色素细胞位于表皮基底层，含有黑色素体；它们通过黑素生成合成色素黑色素。

在这项研究中，研究人员发现外泌体都能降低细胞内黑色素水平，而没有显着的细胞毒性，外泌体的局部制剂减少了色素沉着过度。

治疗 2 周，注意到测试治疗区域和安慰剂对照区域之间黑色素水平降低的统计学显着差异。然而，差异在治疗 4 周后更明显，并持续到治疗后 8 周。

该研究还强调，透皮递送的进一步改进将有助于外泌体产生更深远的黑色素减少活性，这是在体外基于细胞的测定中观察到的。

实际已经为美容或医疗目的开发了各种透皮给药系统，包括化学促进剂、超声波、离子电渗疗法、微针、热消融、微晶换肤术、电穿孔和空化超声，以及已经报道了基于角蛋白水凝胶的微针贴片、无针喷射注射器或离子电渗疗法可以有效地透皮递送外泌体。在研究期间和之后没有皮肤异常（红斑、水肿、脱屑、瘙痒、刺痛、灼痛、紧绷和刺痛）。