来自牙囊干细胞的小细胞外囊泡为牙周组织再生提供新的策略​

间充质干细胞、免疫细胞、外泌体源头实验室

来自牙囊干细胞的小细胞外囊泡牙周组织再生提供新的策略。原标题Small extracellular vesicles from dental follicle stem cells provide biochemical cues for periodontal tissue regeneration,近日(20220303)发表在Stem Cell Research & Therapy,作者来自中国昆明医科大学附属口腔医院云南省口腔重点实验室口腔科等。

背景

 

基于干细胞衍生的小细胞外囊泡 (sEV) 的治疗已被探索为牙周再生中基于干细胞移植的治疗的替代方案。牙囊干细胞 (DFSCs) 在再生医学应用中显示出巨大的潜力。然而,尚不清楚源自 DFSCs 的 sEVs (DFSCs-sEVs) 是否可用于牙周再生。该研究调查了 DFSCs-sEVs 是否可以再生受损的牙周组织及其潜在的潜在机制。

 

来自牙囊干细胞的小细胞外囊泡为牙周组织再生提供新的策略​

 

方法

 

DFSCs-sEVs被分离和鉴定,牙周膜干细胞(PDLSCs)与分离的sEVs共培养。使用 EdU 测定、CCK-8 测定、细胞周期分析、伤口愈合、茜素红染色、qRT-PCR 和蛋白质印迹分析检查 DFSCs-sEVs 对 PDLSCs 生物学行为的影响。RNA测序和功能富集分析用于检测参与DFSCs-sEVs对PDLSCs影响的信号通路。

 

PDLSC 用 ERK1/2 或 p38 MAPK 抑制剂预处理,以研究 ERK1/2 和 p38 MAPK 通路的可能参与。此外,将DFSCs-sEVs与胶原海绵结合并移植到SD大鼠的牙周缺损处,然后使用苏木精和伊红(HE)染色和显微CT检查牙周组织的病理变化。

 

结果

 

PDLSCs 可以内化 DFSCs-sEVs,从而增强使用 EdU 测定、CCK-8 测定和细胞周期分析评估的增殖。DFSCs-sEVs 显着增强了 PDLSCs 的迁移。DFSCs-sEVs促进PDLSCs的成骨分化,显示出深茜素红染色,上调成骨基因(RUNX2、BSP、COL1)和上调蛋白表达(RUNX2、BSP、COL1、ALP)。

 

我们发现 p38 MAPK 信号通过磷酸化被激活。用特异性抑制剂 (SB202190) 抑制该信号通路部分削弱了增强的增殖。DFSCs-sEVs移植后,大鼠受损牙周区域观察到新的牙周韧带样结构和骨形成。在缺损区新形成的牙周韧带和软组织中观察到标记的 DFSCs-sEVs。

 

结论

 

研究表明,DFSCs-sEVs 通过促进 PDLSCs 的增殖、迁移和成骨分化来促进牙周组织再生。DFSCs-sEVs促进PDLSCs增殖的作用可能部分归因于p38 MAPK信号通路的激活。DFSCs-sEVs 为我们提供了一种未来牙周再生的新策略。

 

3-Mar-2022 12:00 PM ESTby Stem Cell Research & Therapy

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